Se analizan los microrrestos biosilíceos recuperados en el sitio Fuerte Sancti Spiritus, primer asentamiento español que se estableció en la cuenca del Río de la Plata en el período de la colonización y conquista europea en América. Está emplazado en Puerto Gaboto, provincia de Santa Fe, Argentina, y consiste en una ocupación breve que se produjo entre mayo de 1527 y septiembre de 1529. La excavación se realizó de acuerdo con la metodología open area, por lo cual el muestreo estuvo distribuido en diferentes rasgos localizados en la planta del emplazamiento. Se analizaron 20 muestras según dos variables: tipo de rasgo y cronología, lo que permitió establecer que se cultivaba maíz, junto con trigo y probablemente cebada, introducidos, concordante con las fuentes etnohistóricas. El análisis permitió, también, estimar el contenido de los rasgos de acuerdo con el sedimento muestreado, posibilitando la caracterización de zonas de descarte, rellenos, niveles de uso y sedimento acumulado con posterioridad al abandono del asentamiento.